GPI錨定服務(wù)

技術(shù)介紹：

在真核生物中的GPI錨有一個(gè)共同的核心結(jié)構(gòu)，該核心結(jié)構(gòu)主要由以下幾部分組成：磷脂酰肌醇、葡糖胺、三個(gè)甘露糖(在釀酒酵母中是4個(gè))和磷脂酰乙醇胺。其結(jié)構(gòu)為（磷脂酰乙醇胺-6-甘露糖-α1-2-甘露糖-α1-6-甘露糖-1-4-氨基葡萄糖-α1-6-磷脂酰肌醇），這一結(jié)構(gòu)在所有物種中都是保守的。其中，磷脂酰肌醇是合成GPI錨的起始分子，磷脂酰肌醇的sn-2位含有一個(gè)多不飽和脂肪酸，多不飽和脂肪酸取代羧基端的跨膜區(qū)而固定于質(zhì)膜上。合成GPI錨前體后，通過(guò)磷脂酰乙醇胺連接位于細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)而形成GPI錨定蛋白。這里需要注意，GPI錨的結(jié)構(gòu)在與蛋白質(zhì)結(jié)合后及參與生物合成過(guò)程中會(huì)發(fā)生重構(gòu)。GPI錨中側(cè)鏈及脂質(zhì)基團(tuán)因其結(jié)合的蛋白質(zhì)隨著物種的不同而呈現(xiàn)多樣性。（GPI結(jié)構(gòu)如上圖）

GPI錨組裝在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜小葉上。完成后，其被轉(zhuǎn)移至內(nèi)腔，并將蛋白質(zhì)的羧基末端連接至GPI錨。在跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)后，通過(guò)將磷脂酰肌醇脂質(zhì)基團(tuán)插入疏水脂質(zhì)雙層中，GPI 錨定蛋白與細(xì)胞膜結(jié)合。一旦產(chǎn)生GPI 錨定蛋白，Man3-GlcN寡糖核心在從細(xì)胞分泌期間可經(jīng)歷額外的糖基化修飾。

GPI 錨定蛋白的釋放可以通過(guò)用磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C（PLC-PI）（本公司可以訂購(gòu)）處理來(lái)完成。該酶特異性地水解磷脂酰肌醇的磷酸二酯鍵，形成游離的1,2-二酰基甘油和糖肽結(jié)合的肌醇環(huán)-1,2磷酸鹽。如果肌醇被酰化，則不會(huì)發(fā)生酶促切割；需要用溫和的堿性條件進(jìn)行預(yù)處理以除去脂肪酸基團(tuán)。在酶促切割后，可以在用Triton® X-114（本公司可以訂購(gòu)）處理膜之后，從不溶性沉淀/級(jí)分中回收GPI錨。從細(xì)胞膜中酶促釋放GPI錨可以觸發(fā)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的第二信使。

本司服務(wù)：

基于本公司較為成熟且很有優(yōu)勢(shì)的蛋白質(zhì)表達(dá)平臺(tái)，抗體制備平臺(tái)，噬菌體展示系統(tǒng)等科研平臺(tái)，根據(jù)您的需求，定制實(shí)驗(yàn)計(jì)劃，包含各物種不同來(lái)源蛋白質(zhì)與GPI的錨定服務(wù)，為您的研究提供便捷。

（下圖：GPI錨定詳細(xì)示意圖）