單克隆抗體的純化——艾柏森生物

單克隆抗體的純化是一個(gè)關(guān)鍵步驟，確保抗體的高純度和活性。以下是一般性的單克隆抗體純化流程：

細(xì)胞培養(yǎng)： 單克隆抗體通常是從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或其他表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)的。首先，需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，以產(chǎn)生抗體。

收集培養(yǎng)上清液： 抗體通常以分泌的形式存在于培養(yǎng)上清液中。上清液是通過離心來去除細(xì)胞碎片和細(xì)胞殘?jiān)缓笫占逡阂赃M(jìn)行后續(xù)處理。

蛋白A親和層析： 蛋白A是一種常用的親和層析介質(zhì)，用于純化大多數(shù)IgG類型的抗體。抗體可以與蛋白A結(jié)合，而其他污染物則不會(huì)結(jié)合，因此可以通過洗脫步驟來純化抗體。

離子交換層析： 如果需要進(jìn)一步提高純度，可以使用離子交換層析來去除殘留的污染物和其他蛋白質(zhì)。通過調(diào)節(jié)鹽濃度和pH值，可以選擇性地洗脫抗體。

尺寸排除層析： 這是一個(gè)常用的步驟，用于進(jìn)一步去除任何殘留的雜質(zhì)，如聚集物或碎片。尺寸排除層析根據(jù)分子大小將溶液分離，較大的分子會(huì)被排除，而較小的單克隆抗體則通過。

濃縮和 buffer exchange： 在純化的最后階段，抗體可以被濃縮，并且可以進(jìn)行緩沖液的交換，以適應(yīng)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)或應(yīng)用。

純化后的分析： 純化后的抗體需要進(jìn)行質(zhì)量分析，包括濃度測定、純度分析、功能測試等，以確保其適用于預(yù)期的應(yīng)用。

以上步驟是單克隆抗體純化的一般流程，具體操作可能會(huì)因?qū)嶒?yàn)?zāi)康摹⒖贵w類型和純化系統(tǒng)的不同而有所變化。