淺析單抗制備的簡要過程

　　單抗制備是機體在抗原刺激下產生的能與該抗原特異性結合的免疫球蛋白。常規的抗體制備是通過動物免疫并采集抗血清的方法產生的，因而抗血清通常含有針對其他無關抗原的抗體和血清中其他蛋白質成分。一般的抗原分子大多含有多個不同的抗原決定簇，所以常規抗體也是針對多個不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對同一抗原決定簇的常規血清抗體，仍是由不同B細胞克隆產生的異質的抗體組成。因而，常規血清抗體又稱多克隆抗體(polyclonalantibody)，簡稱多抗。

 

　　由于常規抗體的多克隆性質，加之不同批次的抗體制劑質量差異很大，使它在免疫化學試驗等使用中帶來許多麻煩。因此，制備針對預定抗原的特異性均質的且能保證供應的抗體是免疫化學家長期夢寐以求的目標。隨著雜交瘤技術的誕生，這一目標得以實現。

 

　　單抗制備的簡要過程：

 

　　骨髓瘤細胞：一般不分泌抗體，能在體外無限繁殖和連續繼代培養，且為HPRT一(次鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶)或TK-(胸腺嘧啶核苷激酶)。多用BALB/C小鼠的骨髓瘤細胞。[小鼠骨髓瘤細胞能在體外無限增殖傳代并不分泌抗體。腫瘤細胞DNA生物合成有兩條途徑：一條由糖、氨基酸合成核苷酸，進而合成DNA，這是主要途徑。這條途徑可被葉酸的拮抗物一氨基喋呤(A)所阻斷(但如果培養基中含核苷酸“前體“次和胸腺嘧啶核苷，即便有A存在，細胞通過另一途徑(稱替代途徑或應急途徑)也可合成核苷酸。但后一途徑需次鳥嘌呤磷酸核糖轉化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)存在)。]

 

　　淋巴細胞：經過免疫處理的淋巴細胞，多用大鼠或小鼠。

 

　　免疫方法：對細胞或微生物抗原可直接注射如小鼠體內，可溶性蛋白抗原可與等量的福氏佐劑混合乳化后，注入到動物體內。